Szkolenia

Szkolenie zaawansowane z wysokosprawnej chromatografii cieczowej HPLC

Szkolenie ma na celu zaznajomienie Uczestnika kursu z zaawansowanymi aspektami pracy z techniką wysokosprawnej chromatografii cieczowej. Uzyskana wiedza i umiejętności pozwolą projektować i rozwijać własne metody chromatograficzne i aplikacje w działach badawczo-rozwojowych zakładów produkcyjnych. Informacje zdobyte na niniejszym kursie dotyczące chromatografii preparatywnej mogą przełożyć się na wdrożenie tej wysoce efektywnej techniki izolacji produktów syntezy organicznej zwłaszcza w sektorze farmaceutycznym. Szkolenie przeznaczone jest dla absolwentów uczelni wyższych, pracowników zakładów produkcyjnych i laboratoriów analitycznych mających już doświadczenie z techniką HPLC.

1
Dzień pierwszy

  • Budowa oraz zasada działania chromatografu cieczowego – powtórzenie wiadomości. Różnice w budowie HPLC i UHPLC
  • Proces rozdziału chromatograficznego. Mechanizmy rządzące rozdziałem. Chromatografia Rapid Resolution
  • Chromatografia jonowo-asocjacyjna
  • Dobór kolumny chromatograficznej w procesie rozwoju metody chromatograficznej – rodzaje faz stacjonarnych, zastosowanie, okresowy przegląd kolumn (kwalifikacja)
  • Chromatografia preparatywna. Zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym. Proces izolowania i badania wzorców
  • Detektory wykorzystywane w chromatografii cieczowej (detektor spektrofotometryczny z matrycą fotodiodową – HPLC-DAD; spektrometr mas HPLC-MS z uwzględnieniem źródeł jonów i analizatorów; tandemowy spektrometr mas HPLC-MS/MS; magnetyczny rezonans jądrowy HPLC-NMR; spektrometr masowy ze wzbudzeniem w plazmie HPLC-ICP/MS)
  • Analiza jakościowa i ilościowa (metoda wzorca zewnętrznego, wewnętrznego i dodatku wzorca) w HPLC
  • Przygotowanie prób do analizy. Ekstrakcja do fazy stałej (SPE); ekstrakcja na włóknach (SPME); derywatyzacja przedkolumnowa
  • Walidacja metod chromatograficznych

PRZERWA KAWOWA

  • Przygotowanie chromatografu do pracy – włączenie urządzenia, przygotowanie oraz podłączenie eluentów, płukanie linii
  • Problemy z transferem metod chromatograficznych na przykładzie HPLC i UHPLC z realizacją gradientu po stronie niskiego i wysokiego ciśnienia

Ćwiczenie 1

  • Analiza śladowa wolnego formaldehydu w próbkach konserwantu stosowanego w kosmetykach poprzez derywatyzację analitu. Metoda wzorca zewnętrznego. Krzywa kalibracji. Wyznaczenie granicy oznaczalności dla metody.

2
Dzień drugi

  • Integracja sygnałów chromatograficznych w trybie manualnym i automatycznym
  • Omówienie wyników z dnia poprzedniego

Ćwiczenie 2

Oznaczenie zawartości kwasu monochlorooctowego w układzie faz odwróconych na kolumnie z oktadecylową faza stacjonarną jako przykład chromatografii jonowo-asocjacyjnej (chromatografii par jonowych). Problem analizy związków polarnych w układzie RP. Przykłady modyfikatorów faz ruchomych.

3
Dzień trzeci

  • Omówienie wyników z dnia poprzedniego
  • Przygotowanie próbek

Ćwiczenie 3

Izolacja związku z mieszaniny poreakcyjnej za pomocą semipreparatywnej chromatografii cieczowej. Projektowanie metody chromatograficznej i przełożenie jej z kolumn analitycznych na preparatywne. Potwierdzenie tożsamości chemicznej wyizolowanego związku dzięki tandemowej spektrometrii mass HPLC-MS/MS.

 

  • Test sprawdzający zdobytą wiedzę
  • Omówienie wyników ćwiczenia 3
  • Dyskusja z udziałem ekspertów na temat problemów i wyzwań w chromatografii cieczowej
  • Zakończenie szkolenia i wręczenie certyfikatów